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ME-Calcium甘露醇糖類檢測(cè)專用柱

發(fā)布時(shí)間: 2018-09-17 10:28   9262 次瀏覽



ME-Calcium系列色譜柱專為高效分離制備水溶性或部分水溶性的有機(jī)化合物而設(shè)計(jì)，可用于分離糖類、有機(jī)酸、多肽和細(xì)胞代謝物中的生物有機(jī)小分子。ME-Calcium系列固定相是在低交聯(lián)度（5%、8%和10%）的聚苯乙烯/二乙烯基苯（PS/DVB）顆粒（5、10 μm）表面鍵合磺酸基團(tuán)（-SO3H），即為ME-Calcium填料；若在此填料上繼續(xù)絡(luò)合不同的離子則形成不同類型的填料。如絡(luò)合離子為鈣離子（Ca2+），則為ME-Calcium填料；如絡(luò)合離子為鉛離子（Pb2+），則為ME-Calcium Pb填料；如絡(luò)合離子為鉀離子（K+），則為ME-Calcium 填料；如絡(luò)合離子為鈉離子（Na+），則為ME-CalciumN填料。

                                                 

5和10 μm ME-Calcium填料電鏡圖



ME-Calcium色譜柱技術(shù)參數(shù)表


 


類型

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

基質(zhì)

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

粒徑 (μm)

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

交聯(lián)度

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

固定相

-SO3H

-(SO3)2Ca

-(SO3)2Pb

-SO3K

-SO3Na

pH穩(wěn)定性

1 – 3

5 – 9

5 – 9

5 – 9

5 – 9

******耐壓 
(psi) (1)

10% 交聯(lián)度

10 μm

1,500

1,500

1,500

1,500

1,500

5 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

8% 交聯(lián)度

10 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

5 μm

800

800

800

800

800

5% 交聯(lián)度

10 μm

600

600

600

600

600

5 μm

400

400

400

400

400

推薦流動(dòng)相

2.5 mM H2SO4
或0.1% H3PO4

H2O

H2O

H2O

H2O

推薦流速
(mL/min)(2)

7.8x300 mm柱

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

4.6x300 mm柱

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

******耐受溫度 (oC)

85

85

85

85

85


(1) 對(duì)于7.8x300 mm柱在******溫度下而言，并扣除儀器的背壓。
(2) 對(duì)于固定相為5 μm的5%交聯(lián)度樹脂、規(guī)格為7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min。



ME-Calcium甘露醇糖類檢測(cè)專用柱特點(diǎn)：

● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性


● 交聯(lián)度：5%、8%和10%


● 與絕大多數(shù)水系流動(dòng)相容（包括純水）


● 離子形態(tài)選擇范圍寬：H+、Ca2+、Pb2+、K+和Na+


● ME-Calcium柱的pH適用范圍為1~3，其他類型ME-Calcium柱的pH適用范圍為5~9


● 包括分析柱和制備柱


均一的粒徑


 


    ME-Calcium 固定相粒徑分布極窄，5 μm為5.0±0.2 μm，10 μm為10.0 ± 0.2 μm。如此均一的粒徑分布確保了賽分產(chǎn)品具有高的分離效率和回收率。圖1表明，分離單糖試驗(yàn)中，ME-Calcium 色譜柱比其他品牌產(chǎn)品具有更高的分離效率。


 


圖1. 相同分離條件下，在ME-Calcium (5 μm, 8%交聯(lián)度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規(guī)格鈣柱上分離6種單糖效果對(duì)比。 


 


17.jpg

流動(dòng)相:     H2O
流速:         0.60 mL/min
溫度:         85 ℃
進(jìn)樣量:     20 μL
檢測(cè):         RI

 


 


不同離子態(tài)


 


    ME-Calcium樹脂多種可選離子態(tài)使得賽分ME-Calcium系列柱可廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的******分離。例如，樹膠醛糖、核糖醇、阿糖醇很難在H柱上分離，卻能在Ca柱上實(shí)現(xiàn)******分離；木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個(gè)重疊峰，而在Pb柱上則能夠依次單獨(dú)流出。


 


不同離子態(tài)的選擇


離子

應(yīng)用

H

發(fā)酵產(chǎn)物、含有機(jī)酸的果汁、醇類和糖類

Ca

含大量果糖的玉米糖漿中的糖類、尤其適用于單糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分離

Pb

木制品中的戊糖和己糖
含有蔗糖、乳糖等的奶制品

K

蔗糖、蜜糖、玉米糖漿、甜菜糖及其他含有糖類植物產(chǎn)品（含有甜菜堿、******基氯化銨等兩性離子的）
甘草膦

Na

低聚糖，尤其在含有大量無(wú)機(jī)鈉離子的情況下，如蜂蜜。


 


低交聯(lián)度


 


    ME-Calcium樹脂的低交聯(lián)度使其在流動(dòng)相中可以適當(dāng)?shù)娜苊洠绕湓诟邷貤l件下這是實(shí)現(xiàn)大多數(shù)分離任務(wù)的典型模式。這種溶脹可以優(yōu)化分離時(shí)的比表面積、滲透性、容量、選擇性，及改變離子強(qiáng)度。PS/DVB粒子的交聯(lián)度越低，樹脂結(jié)構(gòu)***越開放，從而使更大分子量的多聚糖也有良好滲透性。圖2表明，在5% ME-Calcium 柱上，聚己糖(G6)可以很好的從基質(zhì)中分離，并且還能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個(gè)峰得到了分離；而在8% ME-Calcium上不但沒(méi)有G7和G8的峰，連G6的峰都不太明顯。


 


圖2. 不同交聯(lián)度ME-Calcium (5 μm, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線


 


色譜柱:      ME-Calcium Ca-NP5
流動(dòng)相:      H2O
流速:          0.20 mL/min
溫度:          85℃
進(jìn)樣量:      20 μL 
檢測(cè)波長(zhǎng):   192 nm
樣品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)
 

 

car22.jpg


 


******的穩(wěn)定性


 


    ME-Calcium HPLC柱優(yōu)良的制造工藝和******的填裝技術(shù)******了其具有高的穩(wěn)定性。即使是在升高溫度的條件下，ME-Calcium樹脂也能在純水和其他水緩沖體系中保持穩(wěn)定。圖3表明，55℃下，6天內(nèi)連續(xù)沖洗578倍柱體積，酸的保留時(shí)間僅改變了1%。


 


圖3. ME-Calcium  (5 μm, 8%交聯(lián)度)柱55℃下連續(xù)用5 mM H2SO4沖洗后分離有機(jī)酸色譜圖


20.jpg


 

色譜柱:    4.6x 250 mm 
流動(dòng)相:    5 mM H2SO4
流速:        0.30 mL/min    
溫度:        55℃
進(jìn)樣量:     20 μL        
檢測(cè):         RI
樣品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

 

 


 


穩(wěn)定的批間重現(xiàn)性


 


    由于采用了可控的表面化學(xué)修飾技術(shù)并嚴(yán)格監(jiān)控聚合物樹脂的生產(chǎn)過(guò)程，ME-Calcium柱具有很高的批間重現(xiàn)性。圖4表明，不同批次間的保留時(shí)間誤差在0.3%以內(nèi)。


 


圖4. 三個(gè)不同批次ME-Calcium (10 μm, 8%交聯(lián)度)柱分離有機(jī)酸色譜圖


20.jpg


 

色譜柱:   7.8x300 mm         
流動(dòng)相:   2.5 mM H2SO4 
流速:       0.6 mL/min           
溫度:       55 ℃
進(jìn)樣量:    5 μL                
檢測(cè):        RI
樣品:        Mixture of Citric acid, Succunic acid, Formic acid, Acetic acid


 


 
多種分離機(jī)理共同作用


 


    ME-Calcium樹脂表面的抗衡離子(H+，Ca2+，Pb2+，K+和Na+)能緩和分離過(guò)程。通常，分離的過(guò)程涉及兩種或兩種以上的機(jī)理同時(shí)作用，包括體積排阻、離子排斥、離子交換、配體交換、反相作用及正相作用。對(duì)多糖類樣品來(lái)說(shuō)，體積排阻機(jī)理是主要的作用機(jī)理，如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時(shí)的主要機(jī)理則主要是配位效應(yīng)，例如Ca型柱中分離葡萄糖的α、β-異構(gòu)體。在實(shí)現(xiàn)蜂蜜樣品的分離過(guò)程中，首要的機(jī)理為離子排斥作用，該作用使得無(wú)機(jī)鈉離子通過(guò)孔隙被洗脫下來(lái)。而體積排阻和配體交換作用則依次作用于寡聚糖和單糖的分離。對(duì)于分離有機(jī)酸用的ME-Calcium H型樹脂來(lái)說(shuō)，反相作用和離子排阻作用均為首要機(jī)理。疏水性和pKa同時(shí)影響樣品組成的保留時(shí)間。這一特性使得ME-Calcium型樹脂非常適合于監(jiān)測(cè)發(fā)酵過(guò)程中成分的變化。


 


 


ME-Calcium


產(chǎn)品名稱

粒度

交聯(lián)度

規(guī)格

訂貨號(hào)

ME-Calcium

10 μm

5%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

5%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

5%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

5%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 μm

8%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

8%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

8%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

8%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 μm

10%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 μm

10%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 μm

10%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 μm

10%

10x300 mm

511331-10030




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